Avec la fondation de Ville-Marie en 1642 et l’arrivée de Jeanne Mance, infirmière laïque, un petit dispensaire est ouvert à l’intérieur du fort. Le premier Hôtel-Dieu est construit en 1645. Situé dans le Vieux-Montréal, ce premier hôpital compte cinq pièces et abrite six lits. Pendant deux siècles, l’Hôtel-Dieu sera le seul hôpital francophone de Montréal.
Au 19ᵉ siècle, le nombre de malades augmente rapidement en raison de l’accroissement de la population et de nombreuses épidémies telles que le choléra et le typhus. Devenu trop exigu, l’Hôtel-Dieu déménage au pied du mont Royal, à l’angle de l’avenue des Pins et de la rue Saint-Urbain en 1860 - 1861. Pendant près de quatre siècles, le tout premier hôpital de Montréal aura accueilli des centaines de milliers de patients, offrant des services de soins de santé de haute qualité.